LFIA 产品制造中最常见的困难是由组分的复杂性引起的。由于测试受多方面因素影响，原材料不兼容、材料间配合不当或材料特性不完善都可能导致问题。在 LFIA 的开发过程中，大部分注意力都可能集中在寻找最合适的检测方法或选择最佳抗原或抗体上。但是，为了生产出一致且高质量的产品，我们需要关注到所有有可能影响到测试的因素，包括组份，例如底板、胶带和覆盖带。
LFIA 有两种反应模式：夹心法和竞争法。夹心法测试用于较大的分析物，例如人类免疫缺陷病毒 (HIV) 测试中使用的 p24 抗原，以及具有多个抗原位点的分析物，例如妊娠测试中使用的人绒毛膜促性腺激素 (hCG)。hCG 测试是基于夹心的检测的一个例子，其中靶标固定在两个互补抗体之间。在夹心法检测中，出现检测线表示阳性结果，而对照线通常包含物种特异性抗免疫球蛋白抗体，这些抗体对特定结合物中的抗体具有特异性。对于具有单个抗原决定簇的小分子，它们不能同时与两种抗体结合，因此使用竞争法进行检测。在这种类型的检测中，分析物阻断了线上抗体的结合位点，阻止了它们与有色结合物相互作用。因此，（与夹心法相反）检测线中没有信号则表示阳性结果，而对照线应该独立于检测结果可见。
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